增强型自杀基因载体治疗宫颈癌的体外实验研究

摘要：

目的 探讨运用增强子增强hTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用.方法 将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与hTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HeLa细胞后用双荧光素酶系统分析其活性差异;然后构建pHr-SCT/CDTKG治疗载体转染HeLa细胞,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测融合自杀基因mRNA表达,HPLC检测5-FU浓度,MTT分析载体杀瘤的效果.结果 HeLa细胞中增强子能使hTERT启动子活性提高6～13倍,其中SV40-CMV双增强子/hTERT启动子的活性最高,达到CMV增强子/启动子的近3倍;体外转染pHr-SCT/CDTKG后可检测到CDTK的mRNA的表达;细胞上清中5-FU最高浓度为50.83 ug/mL;当5-FC浓度为(3)00ug/mL、GCV浓度为10 ug/mL时,HeLa细胞的相对细胞存活率为48.7%.结论 SV40-CMV双增强子联合hTERT启动子能高效靶向的调控CDTK融合自杀基因杀伤宫颈癌细胞,因而是一种很有前景的基因治疗宫颈癌的策略.

关键词：hTERT启动子、增强子、基因治疗、宫颈癌

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分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30500302;国家重点基础研究发展计划973计划2004CB518800

在线出版日期：2007-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：567-570,575