PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用

摘要：

目的探讨运用PCR(polymerase chain reaction)方法快速筛选DNA文库的可行性.方法以猪α-1,3GT cDNA片段为探针,用cDNA上的特异性序列合成的引物,采用噬菌斑原位杂交和PCR相结合的方法,对猪的gDNA文库进行α-1,3GT基因筛选,经酶切、Southern Blot、测序和荧光原位杂交定位.结果经过两次杂交和一次PCR即得信号很强的7个阳性单克隆,插入子均在8kb以上,且包含第三内含子,其中3个片段测序证实含第三、第四外显子;荧光原位杂交证实该基因位于染色体1q2.10-q2.11.结论PCR可以应用于快速筛选DNA文库.

关键词：DNA、文库、PCR

所属期刊栏目：12

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金NO:30000203;国家"211"工程建设项目[1998]6号;卫生部科研项目98-1-114;美国中华医学会资助项目

在线出版日期：2005-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：48-51