PAB-Gal4-DBD-HA-Twist重组质粒的制备

摘要：

目的：构建人Twist基因的表达载体pAB-Gal4-DBD-HA-Twist，为研究其转录调控机制提供实验工具。方法：重组克隆质粒pcDNA-Flag-Twist用含有特异BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的引物进行聚合酶链反应；对含有两种酶切位点的目的Twist基因片段和pAB-Gal4-DBD-HA载体进行酶切、分离、回收纯化、连接后转入感受态DH5α中，细菌培养，菌落聚合酶链反应、测序鉴定。结果：鉴定结果显示，Twist基因正确克隆到PAB-Gal4-DBD-HA表达载体，并且转入了大肠杆菌中。结论：成功构建了人twist基因PAB-Gal4-DBD-HA-Twist表达载体，为进一步研究其表达、调控、作用机制奠定基础。

关键词：转录因子、Twist、基因克隆、重组质粒

分类号：S85;R38

在线出版日期：2014-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：26-29