10.3969/j.issn.1674-4985.2011.30.004
夹心ELISA检测血清结缔组织生长因子及其初步临床应用
目的 应用抗结缔组织生长因子(CTGF)单克隆抗体和抗CTGF多克隆抗体,建立CTGF免疫分析方法,用其方法检测血清中CTGF含量初步验证其临床应用价值.方法 使用抗CTGF的单克隆抗体包被反应板,辣根过氧化物酶标记兔抗人CTGF多克隆抗体(二抗)建立双抗体夹心方法,通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的CTGF抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法.使用该检测系统和进口试剂盒对照,检测其准确性和可比性.利用该系统检测临床有肝纤维化症状的患者血清标本,初步评价其临床应用价值.结果 该方法有较高的灵敏度、特异性及稳定性,最低检测限批间和批内变异系数分别为0.98 ng/ml、9.8%、4.9%.与进口试剂盒有很强的可比性,两者的相关系数r=0.988.初步临床标本检测证实,肝硬化、慢性肝炎急性肝炎患者的血清CTGF含量明显高于建康对照者(P<0.01),肝硬化患者的血清CTGF水平明显高于慢性肝炎和急性肝炎患者(P<0.01).结论 成功地建立了一种测定血清CTGF的双抗体夹心方法,该反应系统有较高的灵敏度和特异性,和进口试剂盒有很强的可比性,为临床广泛使用打下了基础.
乙型肝炎、结缔组织生长因子、ELISA
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R44;S85
2011-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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