长链非编码RNA母系表达基因3对肝内胆管癌RBE细胞耐药性的影响
目的 探讨长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)对肝内胆管癌RBE细胞株耐药性的影响.方法 构建MEG3质粒,通过阳离子复合物瞬时转染法,使RBE细胞MEG3过表达,转染48 h后在共聚焦显微镜下观察转染效率;应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胆管癌RBE细胞株中MEG3的表达情况,同时应用蛋白质印迹法检测转染前后细胞中耐药相关基因ABCG2基因及蛋白表达量的差异;四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定转染质粒48 h后,各个组中加入不同浓度的阿霉素继续培养2 d,测定RBE细胞对阿霉素的药物敏感性.结果 吸光共聚焦显微镜下观察质粒可以成功转染RBE细胞;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法显示,与空白对照组相比,目的质粒组中ABCG2基因及蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而空载质粒组相比差异无统计学意义(P>0.05);MTT法测得随药物浓度增加,细胞生长抑制率也逐渐升高,而且在浓度0.5 g/L时,目的质粒组细胞对药物敏感性较强,进一步证实MEG3抑制ABCG2基因表达的同时降低了细胞的耐药作用.结论 长链非编码RNA MEG3在胆管癌RBE细胞中,可以降低ABCG2基因和蛋白的表达,同时提高了肿瘤细胞对阿霉素的敏感性,对于胆管癌的靶向治疗提供了新的思路和方向.
基因表达、肝内胆管细胞癌、耐药性、药物耐受性
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R73;R39
山西省回国留学人员科研项目2011-046;山西省留学回国人员科技活动择优资助项目2011-762;山西医科大学基础医学院331基础医学科技培植基金计划项目201407;山西医科大学校创新基金01201302
2017-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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