CDCA7基因在食管鳞癌细胞系中的表达及其对细胞增殖凋亡的影响
目的 明确CDCA7基因在食管鳞癌各种细胞系中的表达量及其对细胞表型的影响.方法 ①实时聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞系及永生化食管上皮细胞系中的CDCA7基因的表达水平;②构建CDCA7基因的敲除载体pLKO.1-puroshRNA-CDCA7;③将pLKO.1-puro-shRNA-CDCA7和对照空载体pLKO.1-puro转染到内源性高表达CDCA7基因的食管鳞癌细胞系ECA109中;④用real-time PCR和蛋白质印迹法验证筛选出的单克隆细胞;⑤四甲基偶氮唑盐(MTT)试验、克隆形成试验、细胞凋亡试验验证CDCA7基因敲除后对细胞表型的影响.结果 ①在食管鳞癌的各种细胞系中,ECA109是内源性高表达CDCA7基因的细胞系之一;②成功构建了pLKO.1-puro-shRNA-CDCA7的敲除质粒,并筛选出稳定敲除CDCA7基因的单克隆细胞株;③MTT、克隆形成试验结果显示,敲除CDCA7基因可以降低食管鳞癌细胞的增殖能力和克隆形成能力;④细胞凋亡试验结果显示,敲除CDCA7基因能够加速食管鳞癌细胞的凋亡.结论 CDCA7基因的敲除能够对食管鳞癌细胞系的细胞表型产生影响,会抑制癌细胞的增殖能力和克隆形成能力,加速癌细胞的凋亡.
食管肿瘤、CDCA7、细胞凋亡
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R73;R57
国家自然科学基金81602175
2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
461-464,前插1
