酪酸梭菌对HT-29细胞水通道蛋白3表达的影响及JNK和p38信号通路对其调控作用
目的：明确酪酸梭菌对人结肠腺癌细胞HT-29细胞水通道蛋白3（AQP3）mRNA和蛋白表达的影响以及c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38信号转导通路对其表达的调控作用。方法用酪酸梭菌上清液作用于HT-29细胞后，应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹方法检测AQP3 mRNA和蛋白表达水平。AQP3表达水平有差异后测定总JNK、p38以及磷酸化的JNK（P-JNK）和磷酸化的p38（P-p38）蛋白表达水平。后分别加用JNK抑制剂SP600125和p38抑制剂SB203580后测定AQP3蛋白表达量，观察JNK和p38对AQP3表达的调控作用。统计学处理采用单因素方差分析。结果实时定量RT-PCR和蛋白印迹法结果显示酪酸梭菌上清液不同浓度（1∶4和1∶8组）作用HT-29细胞12 h以及同一浓度1∶4作用不同时间（24、12、6 h组）的AQP3 mRNA和蛋白表达水平均较无酪酸梭菌上清液作用组明显上调（P均＜0．05）。蛋白印迹法结果显示酪酸梭菌上清液组的P-p38/p38和P-JNK/JNK蛋白相对量较空白对照组表达水平明显上调（F＝26．065和65．034，P＜0．05）。蛋白印迹法结果显示加入p38抑制剂SB20358010μg/ml组和20μg/ml的AQP3蛋白表达相对量为（0．7±0．4）和（0．6±0．6）、加入JNK抑制剂SP60012510μg/ml组和20μg/ml的AQP3蛋白表达相对量为（0．7±0．4）和（0．5±0．4）均较未加入抑制剂组（1．1±0．7）AQP3蛋白表达水平明显下调（F＝36．225，P＜0．05）。结论酪酸梭菌上清液能够上调HT-29细胞的AQP3表达进而调节肠道的水代谢。JNK和p38信号转导通路可能参与调控AQP3的表达。
酪酸梭菌、水通道蛋白3、HT-29细胞、JNK/p38信号通路
R44;R73
山西省卫生厅科技攻关项目201201054
2015-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
1620-1623
