高温促进含第1类整合子宿主菌的重组效率

摘要：

目的 探讨高温对大肠杆菌BL21 (DE3)宿主中第1类整合子重组效率的影响.方法 用pUC19为载体构建高表达整合酶的重组质粒pUCINT,随后在pACYC184载体的不同位置分别插入整合子以及氨基糖苷腺苷转移酶(aadA2)基因盒,该重组质粒命名为pACINAD,将这2种相容的重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),将20株此菌株随机分成2组,每组各10株,分别在41 ℃和37 ℃培养24h后用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定发生重组反应的整合子的拷贝数和总的整合子的拷贝数,前者与后者的比值即为重组效率.结果 在41℃大肠杆菌BL21(DE3)宿主中所测得的重组效率为(1.8±0.5)×10-3,在37℃的重组效率为(1.8±0.5)×10-4.41 ℃组明显高于37℃组,差异具有统计学意义(t=9.266,P＜0.01).结论 高温可显著提高由整合酶介导的aadA2基因盒的重组效率.

关键词：整合子类、抗药性、重组效率、高温

所属期刊栏目：13

分类号：S85;R73

资助基金：山西省自然科学基金2012011041-2

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1259-1262