GCS基因与MDR1基因在肝癌细胞多药耐药中的相关性研究
目的 观察葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因高表达对肝癌细胞HepG2内多药耐药基因(MDR1)表达的影响,探讨GCS基因参与肝癌多药耐药的作用机制.方法 脂质体法将GCS基因真核表达质粒pEGFP-GCS导入肝癌细胞株HepG2中,应用G418筛选培养,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞GCSmRNA和MDR1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测细胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测基因转染前后阿霉素对HepG2细胞半数抑制浓度(IC50)的变化.结果 转染后HepG2细胞内GCS mRNA和蛋白的表达水平显著提高(P<0.05),而MDR1 mRNA及P-gp的表达水平亦显著提高(P<0.05) ;同时,MTT法检测结果显示GCS基因转染后HepG2细胞对阿霉素的耐药性显著提高(P<0.05),IC50从(6.2±0.4)μg/ml上升到(11.6±1.0) μg/ml.结论 高表达GCS可以上调HepG2细胞中MDR1的表达,使HepG2细胞发生多药耐药.
肝肿瘤、葡萄糖神经酰胺合成酶基因、多药耐药基因
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R73;R97
山西省青年科技研究基金2011021035-3
2013-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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