脂质体介导的肝细胞生长因子基因在脐静脉内皮细胞中的表达与鉴定

摘要：

目的构建含肝细胞生长因子(HGF)基因真核表达载体pEGFP-N1-HGF,观察HGF基因在人脐静脉内皮细胞中的表达.方法由重组质粒pRc/CMV-HGF中扩增出HGF基因,将其克隆到含增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1中,应用脂质体将重组质粒pEGFP-N1-HGF转染到人脐静脉细胞株ECV304中,G418筛选获得稳定表达克隆,采用荧光显微镜观察、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学方法鉴定.结果经G418筛选后可形成抗性细胞克隆;荧光显微镜下观察到有绿色荧光;RT-PCR能扩增出HGF mRNA预期的699 bp片段;免疫细胞化学证实转染HGF基因的细胞有HGF蛋白的表达.结论重组质粒pEGFP-N1-HGF能够在细胞株ECV304转录、表达.

关键词：脂质体、肝细胞生长因子、内皮细胞

所属期刊栏目：6

分类号：R3(基础医学)

资助基金：山西省青年基金20031061

在线出版日期：2006-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：36-38