10.3969/j.issn.1671-2560.2003.05.010
肝细胞生长因子对兔骨髓基质细胞生物学特性的影响
目的观察腺病毒携带肝细胞生长因子cDNA(adHGF)转染兔骨髓基质细胞(MSC)后的主要生物学特性.方法抽取成年雄性新西兰白兔骨髓,密度梯度离心获得MSC.取兔膝关节软骨,体外培养软骨细胞至第3代.adHGF转染第5代MSC, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞增生活力,阿尔新蓝法检测细胞培养上清液中氨基己糖多糖(GAG)含量.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测adHGF转染MSC后HGF的表达.免疫组织化学染色及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅰ、Ⅱ型胶原表达.结果原代MSC为短梭形、簇状生长,传代细胞呈长梭形、旋涡样生长.adHGF转染前后细胞增生状态差异无显著性.MSC转染后GAG含量增加.免疫组织化学染色MSC转染前后I型胶原阳性,转染后Ⅱ型胶原弱阳性.转染后HGF表达量在转染1周内最高,达120.5 ng/ml,并可持续至6周.RT-PCR表明MSC在adHGF转染前后均表达I型胶原,转染后微量表达Ⅱ型胶原.结论 MSC在体外培养过程中的自然转归是趋向于成骨.MSC不仅是HGF的源细胞,而且可作为靶细胞接受外源目的基因的转染并有效表达.
肝细胞生长因子、骨髓细胞、软骨细胞
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R68(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
国家自然科学基金30170949
2003-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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392-395