纯合子p.Gly1715Ser导致的遗传性凝血因子V缺陷症家系分析
目的 对一个由近亲婚配引起的遗传性凝血因子V(FV)缺陷症家系进行实验室表型检测与基因突变分析,初步探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系成员(3代6名成员)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、血浆FV活性(FV∶C)、FV抗原(FV∶ Ag)及其他相关凝血指标进行表型诊断.通过CAT法检测凝血酶生成量.采用DNA直接测序法分析先证者F5基因的所有外显子、侧翼、5'和3'非翻译区及其家系成员相应突变位点区域,发现突变位点用反向测序证实.通过在线生物信息学软件(包括Mutation Taster、PROVEAN、SIFT及PolyPhen-2)预测和分析突变的致病性;用ClustalX-2.1-win分析突变氨基酸的保守性;利用Swiss-Pdb Viewer构建蛋白模型分析突变对蛋白质空间构象及功能的影响.结果 先证者PT和APTT均显著延长,分别为26.3 s/13.2 s和73.5 s/36.0 s;FV∶ C和FV∶ Ag明显降低,分别为3％和7％.先证者凝血酶生成试验峰高明-显降低,延迟时间和达峰时间均显著延长,凝血酶生成潜力显著下降.基因分析显示先证者F5第16外显子存在c.5227G＞A纯合错义突变(p.Glyl715Ser),其父亲、母亲、儿子和女儿均携带p.Glyl715Ser杂合子.保守性分析结果表明 p.Gly1715Ser 在同源物种间高度保守;PolyPhen-2、Mutation Taster、PROVEAN 和 SIFT 四个软件对 p.Gly1715Ser突变预测结果一致,均提示该突变为有害突变,可影响蛋白质功能.蛋白模型分析结果表明,p.Ser1715突变为p.Gly1715后,与周围氨基酸之间氢键发生改变并形成新的分子间作用力,使FV蛋白空间结构发生改变.结论 该先证者F5基因第16外显子存在c.5227G＞A纯合错义突变遗传自近亲婚配的父母,且c.5227G＞A突变与该家系FV水平降低有关.
凝血因子V缺陷症、生物信息学、近亲婚配、基因突变
30
R551;R394;R735.34
2023-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1822-1827
