子痫前期中整合素α5的DNA甲基化水平及其对滋养细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响
目的 探究整合素α5(ITGA5)在子痫前期(PE)胎盘中的甲基化水平及其对滋养细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 收集2018年7月至2020年7月在我院产科分娩的32例子痫前期患者(PE组)与38例正常妊娠孕产妇(Control组)的胎盘组织,分别应用反转录酶-定量聚合酶连锁反应(RT-qPCR)、免疫印迹(Western blot)及免疫组织化学染色检测ITGA5在两组孕产妇胎盘组织中的mRNA、蛋白表达及其定位;甲基化特异性PCR(MSP)与亚硫酸盐测序PCR(BSP)检测ITGA5基因甲基化水平在PE组与Control组胎盘中的差异;体外培养滋养细胞系HTR8与JEG-3,应用脂质体转染技术将过表达ITGA5质粒与空载体质粒分别转染入滋养细胞中,并将其记为pcCtrl组与pcITGA5,再次应用RT-qPCR、Western blot试验检测转染效率;分别利用CCK-8增殖试验、划痕试验及Transwell侵袭试验检测过表达ITGA5对滋养细胞的增殖、侵袭及侵袭能力的影响;Western blot检测过表达ITGA5对滋养细胞中磷脂酰肌醇三激酶(PI3K)的丝氨酸473(Ser473)和蛋白激酶B(AKT)的苏氨酸308(Thr308)位点的磷酸化水平的影响.结果 与Control组相比,主要定位于滋养细胞中的ITGA5在PE胎盘组织中的mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.05),而ITGA5基因的DNA甲基化水平却显著增加(P＜0.05);与HTR-8或JEG-3的pcCtrl组细胞相比,pcITGA5组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均显著增强(P＜0.05),PI3K、AKT的Ser473和Thr308位点的磷酸化水平也显著升高(P＜0.05).结论 本研究表明PE胎盘中ITGA5的启动子区域高甲基化水平导致其在PE胎盘组织中的表达显著降低,而体外过表达ITGA5可能通过激活PI3K/AKT通路促进滋养细胞的增殖、迁移及侵袭能力.
子痫前期;整合素α5(ITGA5);DNA甲基化;滋养细胞
29
海南省卫生计生委科研基金项目18A200189
2022-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1519-1525
