运用PCR-SSP技术对羊水细胞ABO血型基因定型研究
目的 探讨PCR序列特异性引物(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)技术对胎儿羊水细胞ABO血型基因定型研究,分析母儿血型吻合情况.方法 选择2008年1月～2010年2月于我院优生优育门诊及产前诊断中心就诊O型血孕妇80例,其丈夫血型分别为A型40例,B型37例,AB型3例.以上80例孕妇于孕16～21周在B超直视下经腹羊膜腔穿刺抽取羊水20～30ml,其中10ml经高速离心取沉淀的羊水细胞,用常规酚氯仿法提取羊水DNA,运用PCR-SSP技术通过PCR反应特异性扩增ABO基因片段,凝胶电泳检测PCR产物,根据产生的特异性PCR产物来鉴定相应的基因来分析血型.同期运用变性高效液相色谱分析(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术对羊水血型检测结果进行验证.余20ml羊水行细胞培养细胞遗传学分析.另回访40例已出生的胎儿,采集外周静脉血分别运用PCR-SSP技术和常规血清学检测方法鉴定ABO血型,比较产前和产后血型检测结果.结果 运用PCR-SSP技术从80例羊水DNA中成功检测79例(79/80,98.75%),其血型分别为A型21例,B型20例,O型38例.同期运用DHPLC技术对PCR-SSP技术检测结果进行验证,两种检测结果相符.已出生40例婴几外周血血型分析结果与产前诊断血型结果相符.结论 PCR-SSP技术产前诊断胎儿羊水ABO血型具有可行性,进而分析母儿血型吻合情况,为ABO抗体效价显著增高的孕妇临床用药指导提供实验室依据.
ABO血型基因型、ABO母儿血型不合、羊水细胞、产前诊断、PCR-SSP技术
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R394.3
深圳市科技;信息局资助项目
2011-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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