人YPEL4基因的原核表达及兔血清多克隆抗体的制备与鉴定
目的 通过PCR技术扩增,将YPEL4基因亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,经酶切及测序鉴定后,转化E.coli BL21大肠杆菌,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导融合蛋白表达.融合蛋白在细菌裂解液的包涵体和上清中都有较高的表达,故取其上清液用谷胱甘肽琼脂糖珠(Glutathione sepharo-seTM 4B)亲和纯化目的蛋白.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,进行WesternBlot检测抗体及其效价.结果 获得了高效价的特异性兔抗YPEL4多克隆抗体,为YPEL4基因进一步的功能研究奠定了基础.
YPEL4、融合蛋白、多克隆抗体
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R394.3
2009-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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18-20,26