利用CRISPR/Cas9技术编辑甘蓝型油菜富甘氨酸蛋白基因BnGRP1的初步研究

摘要：

富甘氨酸蛋白(glycine rich proteins,GRPs)在植物逆境响应中发挥重要作用.前期通过全基因组关联分析获得油菜响应低磷胁迫的候选基因BnGRP1,但是其响应低磷胁迫的分子机制尚不明确.序列分析发现,Bn?GRP1的CDS全长为399 bp,编码132个氨基酸,其中62个为甘氨酸,占该蛋白氨基酸总量的47.0％.为进一步研究BnGRP1的生物学功能,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了目标基因的双靶点载体G2-TD1TD2,并遗传转化甘蓝型油菜,通过筛选鉴定获得了13株T0代转基因阳性植株.通过TA克隆和测序技术分析了5株转基因植株中Bn?grp1的突变位点,其中3株的目标基因序列发生突变,导致无法编码形成正常的富甘氨酸蛋白.本研究为研究Bn?GRP1的生物学功能提供了实验材料,也为进一步研究BnGRP1响应低磷胁迫的分子机制提供理论和实验基础.

关键词：甘蓝型油菜、BnGRP1、低磷胁迫、基因编辑

所属期刊栏目：45

分类号：S565.4(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金;山东省自然科学基金;大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2023-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：38-45