10.19802/j.issn.1007-9084.2019305
多重PCR技术检测4种大豆镰孢菌根腐病病原
镰孢菌是引起大豆根腐病的常见病原菌,传统检测病原镰孢菌的方法存在操作繁琐、时间长、成本高和效率低等缺点,建立一种快速检测方法显得尤为重要.本研究基于翻译延伸因子序列(EF-1α)建立了检测镰孢菌(Fusarium species)的多重PCR反应体系,检测了多重PCR体系灵敏度,模拟侵染样本验证多重PCR技术的可行性.实验结果表明,该方法能够通过扩增片段的大小区分锐顶镰孢菌(Fusarium acuminatum)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、茄病镰孢菌(Fusarium solani)和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum).灵敏度检测显示,最低检测基因组DNA浓度达1×10-4 ng/μL;模拟侵染样本实验表明,使用镰孢菌和大豆基因组混合样本作为模板,在DNA浓度为100 ng/μL时仍能准确检测出目的条带.因此.以翻译延伸因子序列为靶标建立的多重PCR技术,能够灵敏、特异性地检测出该四种镰孢菌,可在复合侵染引起大豆镰孢菌根腐病的病原菌鉴定中准确检测.
大豆根腐病、镰孢菌、翻译延伸因子、多重PCR
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S435.651(病虫害及其防治)
国家自然科学基金青年基金31601586
2021-04-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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307-313