基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用

摘要：

基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节.为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法.选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase am-plification,RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增.结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法.不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要.利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分.

关键词：基因组、DNA快速提取、转基因检测、现场检测

所属期刊栏目：43

分类号：S565.1;Q943.2(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金31772098

在线出版日期：2021-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：70-76