10.7505/j.issn.1007-9084.2018.03.016
黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响
为提高黄曲霉毒素的检测灵敏度,探明黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响.采用黄曲霉毒素M1与羧甲氧基羟氨半盐酸盐进行肟化反应生成半抗原,再经活泼脂法,将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)脱水反应实现偶联,生成自制人工抗原AFM1-BSA.采用竞争ELISA法、荧光与紫外光谱法鉴定,结果均证明自制人工抗原AFM1-BSA合成成功.进一步通过摩尔消光系数测算得AFM1的自制和商业抗原偶联比分别为0.7和6.3,自制抗原偶联比仅是商业抗原的1/9,二者偶联方法相同,但偶联比差异显著,为进一步研究比较提供了可能.将自制人工抗原AFM1-BSA和商业抗原AFM1-BSA分别与实验室自制的系列黄曲霉毒素单抗1C11、2C9、LM13、LM47反应,结果显示四种抗体对商业抗原均有很高的灵敏度,只有2C9对自制人工抗原有较高的灵敏度(1.997ng/mL),明显低于商业抗原作为包被抗原与2C9反应时的灵敏度(0.047ng/mL),说明针对同一种毒素AFM1制备的抗体,高偶联比抗原有助于提高免疫分析灵敏度.研究结果为AFM1高灵敏免疫检测技术研究提供了科学依据.
黄曲霉毒素M1、人工抗原、抗原鉴定、偶联比、ELISA
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S379.7(农产品收获、加工及贮藏)
农业科学研究专项基金201203094-4;"科学研究"1999年度公共利益特别研究基金201513006-02;国家自然科学基金31101299,31171702,31401601,21205118,401402
2018-08-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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