栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达

摘要：

根据NCBI中发表的大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)序列(AF303939-1)设计特异引物,以吉农13大豆为实验材料,采用Trizol法提取叶片总RNA,通过RT-PCR克隆大豆rbcS的cDNA.将该基因与原核表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞,双酶切鉴定后筛选阳性克隆,测序结果显示:rbcS全长696bp,其中开放阅读框为537bp,编码178个氨基酸;选择含大豆rbcS cDNA阳性克隆菌液IPTG诱导,经SDS-PAGE分析,诱导表达出分子量为29.1 kDa的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符.诱导7h蛋白表达量最高,为64.15％.

关键词：栽培大豆、rbcS、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q785;S565.103(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31171459;吉林省自然科学基金201215178

在线出版日期：2014-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：329-333