泽泻醇A保护血脑屏障改善脑缺血/再灌注损伤的作用和机制研究

摘要：

目的 探讨泽泻醇A(alisol A,AA)通过抑制基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)改善皮层血脑屏障(blood brain barrier,BBB)障碍介导的脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI).方法 构建小鼠全脑缺血/再灌注(global cerebral ischemia-reperfu-sion,GCI/R)体内动物模型,AA灌胃干预7 d(30 mg· kg-1),改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)、旷场和Y迷宫实验检测神经功能,磁共振波谱(magnetic resonance spectroscopy,MRS)检测皮层相关代谢物质水平,透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察皮层BBB超微结构,蛋白免疫印迹法和免疫组织化学检测皮层MMP-9蛋白表达,分子对接分析AA与MMP-9结合的可能性.结果 相较于假手术组(Sham),GCI/R组小鼠mNSS评分升高、旷场总路程和中心路程占总路程比值均减少、Y迷宫交替率降低(P＜0.01),而AA干预组(GCI/R+AA)较GCI/R组小鼠mNSS评分降低、旷场总路程和中心路程占总路程比值增加、Y迷宫交替率增加(P＜0.01)o MRS检测发现GCI/R组小鼠大脑皮层γ-氨基丁酸、N-乙酰天门冬氨酸表达降低,胆碱、肌醇和牛磺酸表达升高(P＜0.01);GCI/R+AA组小鼠γ-氨基丁酸、N-乙酰天门冬氨酸表达升高,胆碱、肌醇和牛磺酸表达降低(P＜0.01).TEM发现GCI/R组小鼠脑微血管基膜塌陷、管腔变窄;内皮细胞被激活、质膜褶皱且间隙变大,紧密连接破坏;星形胶质细胞终足肿胀.GCI/R+AA组小鼠血管管腔充盈;内皮细胞质膜平整,紧密连接完好;星形胶质细胞终足相对正常.蛋白免疫印迹和免疫组织化学检测发现GCI/R组小鼠皮层MMP-9表达水平明显升高(P＜0.01),GCI/R+AA组明显降低(P＜0.05).分子对接发现AA与MMP-9可通过TYR-50和ARG-106两个基团结合,结合能为-6.24 kcal· mol-1.结论 AA治疗可改善GCI/R小鼠皮层CIRI,其机制可能是通过抑制MMP-9升高造成BBB损伤.

关键词：脑缺血/再灌注损伤、基质金属蛋白酶9、泽泻醇A、血脑屏障、神经保护、分子对接

所属期刊栏目：40

分类号：R-332;R284.1;R322.81;R345.63;R743.31(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金;福建省卫健委科技计划项目;福建省自然科学基金资助项目

在线出版日期：2024-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：83-90