青藤碱对有机锡损伤肝HL02细胞的保护作用及其机制

摘要：

目的 观察青藤碱(sinomenine,SIN)对二氯二丁基锡(dibutyltin,DBT)诱导人肝细胞(HL02)损伤的保护作用并探讨潜在作用机制.方法 HL02细胞的体外培养,设置对照组、模型组、SIN(4～16 μmol·L-1)组.通过MTT法和形态学观察,研究SIN对DBT损伤HL02细胞的保护效果.使用AO/EB荧光染色法观察细胞凋亡情况;采用Annexin V-FITC/PI双重染色法测定细胞凋亡率.DCFH-DA染色法测定细胞内活性氧(ROS)水平;使用JC-1染料检测线粒体膜的电位变化.采用qRT-PCR技术检测凋亡相关蛋白mRNA的表达.Western blot 检测 Bcl-2、Bax、caspase-9 与 cleaved-caspase-3蛋白的表达.结果 SIN(4-16 μmol·L-1)可以浓度依赖性地减轻DBT所引起的HL02细胞活力下降及形态学改变、降低细胞凋亡率和细胞内ROS的产生,并部分恢复线粒体膜电位,同时增强Bcl-2、Bcl-xL的mRNA水平、降低 Bad、Bax、cytochome-c、Apaf-1、caspase-9 与 caspase-3 的mRNA表达水平.此外,SIN上调Bcl-2/Bax比例,降低caspase-9 与 cleaved-caspase-3 蛋白表达.结论 SIN 对 DBT诱导的HL02细胞损伤具有保护作用,其机制可能与细胞内ROS介导的线粒体凋亡途径有关.

关键词：青藤碱、二氯二丁基锡、HL02、ROS、凋亡、线粒体

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分类号：R284.1;R329.24;R329.25;R916.4;R996(中药学)

资助基金：国家重点研发计划;山西省工程创新团队建设黄芪活性分子作用机制与健康产品研发创新团队;山西省自然科学基金

在线出版日期：2022-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1535-1541