细胞缝隙连接对miR-124抗肿瘤作用的影响和机制研究

摘要：

目的 探讨不同连接蛋白(connexin,Cx)组成的缝隙连接(gap junction,GJ)对miR-124抗肿瘤作用的影响及机制.方法 在稳定转染表达Cx26或Cx32的Hela细胞(He-la26、Hela32),以及稳定转染shRNA-Cx43的人胶质瘤U87细胞(U87 shRNA-Cx43)中,应用Western blot和荧光示踪实验分别测定Cx表达和GJ功能;集落形成实验检测miR-124对细胞增殖影响;膜片钳检测Cy3荧光标记的miR-124在细胞间的传递.结果 多西环素可诱导Hela26和Hela32细胞上Cx表达和GJ形成;miR-124抑制Hela细胞增殖,但在有GJ(Dox诱导)和无GJ形成(无Dox诱导)条件下统计学上无明显差异.相较于U87 shRNA-NC,U87 shRNA-Cx43细胞中Cx43表达、GJ功能及miR-124的增殖抑制作用均明显降低;显微镜下可见导入到"供体细胞"中的荧光miRNA逐渐布满整个细胞并传递到相邻非"导入"细胞内.结论 GJ可影响miR-124的抗肿瘤作用,但具有Cx异质性.相较Cx26或Cx32,Cx43组成的GJ可调控miR-124的抗肿瘤作用,这可能与该GJ通道对miR-124的传递作用较强有关.

关键词：细胞缝隙连接、microRNA-124、缝隙连接蛋白26、缝隙连接蛋白32、缝隙连接蛋白43、肿瘤

所属期刊栏目：35

分类号：R329.24;R341;R342.2;R730.264;R977.6(人体形态学)

资助基金：国家重点研发计划2017YFC0909900;郑州大学第一附属医院院内青年创新基金YNQN2017137

在线出版日期：2019-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1528-1534