巨噬细胞来源的外泌体不同提取方法的比较

摘要：

目的 根据聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)沉淀原理,结合超高速离心改进一种简便、快速的细胞外泌体分离方法.方法 采用超高速离心法、PEG6000沉淀结合超高速离心和EXO Quick试剂盒,分别提取巨噬细胞外泌体.通过透射电镜、NanoSight ZS及Nanoparticle tracker(NTA)分析外泌体的形态和粒径;蛋白印迹法鉴定细胞外泌体标志物Alix、TSG101的表达情况.结果 PEG6000沉淀结合超高速离心法获得的外泌体,其粒径分布和差速离心法相当,小于商品化的 EXO Quick 试剂盒.而外泌体表面蛋白 Alix、TSG101在3种方法提取的沉淀物中都有表达.透射电镜结果显示,3种方法均获得典型的盘状囊泡.结论 实验改进的细胞外泌体提取方法操作简洁、效率高,并且成本较低.

关键词：巨噬细胞、外泌体、蛋白印迹法、透射电镜、纳米粒子示踪技术、聚乙二醇

所属期刊栏目：34

分类号：R329.24;R341;R392-33;R392.11;R977.6(人体形态学)

资助基金：国家中医药管理局中药标准化项目2017HZ5;安徽省科技攻关计划项目1301042099

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：589-592