天麻素在甲基苯丙胺诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用及机制研究

摘要：

目的 研究天麻素(gastrodin)在甲基苯丙胺(metham-phetamine,METH)诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,不同浓度的 METH(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mmol· L-1)处理SY5Y细胞,并在6、12、24、48 h观察SY5Y细胞自噬的情况,确定自噬的最佳浓度和时间点.提前1h给予1 mmol·L-1天麻素进行干预,用显微镜观察细胞形态变化,采用激光共聚焦显微镜观察LC3-Ⅱ的改变,Western blot检测天麻素干预前后LC3-Ⅱ、Beclin-1以及Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达情况.结果 随着METH浓度(0~3.0 mmol ·L-1)的增加,SY5Y细胞逐渐变圆、突起逐渐变短、消失,同时部分细胞质内可见大小不等的空泡结构形成,细胞间隙逐渐增宽,最终细胞呈漂浮状态.随着 METH 浓度的增加, SY5Y细胞LC3-Ⅱ表达水平逐渐增强.激光共聚焦显微镜结果显示,天麻素+METH组LC3-Ⅱ的表达水平比METH组降低.与对照组相比,METH组LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显增强(P<0.01),mTOR和Akt差异无显著性,p-mTOR、p-Akt表达水平明显降低(P<0.01);给予天麻素干预后,与METH组相比,LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平降低,而mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt表达水平升高.结论 METH可诱导SY5Y细胞自噬,天麻素可减弱METH诱导的SY5Y细胞自噬,这一作用与天麻素调控Akt和mTOR信号通路密切相关.

关键词：甲基苯丙胺、SH-SY5Y细胞、天麻素、自噬、神经毒性、信号通路

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分类号：R284.1;R329.24;R971.7;R971.93;R977.6;R977.9(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81560303,81660310;云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项016FE467;云南省重大传染病疫苗研发重点实验室开放研究基金资助项目KF2015-01;昆明医科大学毒品滥用法医病理学科技创新团队CXTD201604;云南省教育厅研究生科技创新项目2017YJS077

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：577-583