10.3969/j.issn.1001-1978.2015.08.029
hFcεRIα/RBL-2 H3细胞株的构建与评价
目的:构建稳定表达人 FcεRIα( hFcεRIα)亚基的RBL-2H3细胞株。方法利用 RT-PCR技术克隆 hFcεRIα基因,构建真核表达载体 pCI-neo-hFcεRIα。脂质体介导法转染RBL-2H3细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法鉴定转染结果。结果通过对脂质体介导转染体系进行优化,转染效率可高达75.38%。经 Western blot、免疫荧光及 RT-PCR 鉴定, hFcεRIα基因在RBL-2H3细胞内成功表达。结论成功构建hFcεRIα/RBL-2H3细胞模型,为深入研究IgE与FcεRI作用机制及相关药物开发提供了实验基础。
hFcεRIα、IgE、RBL-2H3 细胞、脂质体转染、G418 筛选、稳定细胞株
R329.24;R392.11;R394.2;R593.1(人体形态学)
国家自然科学基金资助项目81202338;河北省自然科学基金资助项目H2013201128;中国博士后科学基金资助项目2013M530885;河北省教育厅项目Z2015013
2015-09-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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