胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质代谢的时效性研究
目的 探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cells line,HKC cells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞内脂滴形成的时效性影响.方法 给予人肾小管上皮细胞100 nmol·L~(-1)胰岛素刺激并根据刺激时间分为0、2、4、6、12和24 h组.SREBP-1和FAS mRNA采用RT-PCR检测,SREBP-1蛋白的表达用免疫细胞化学和Western blot检测,细胞内脂滴检测采用油红O染色.结果 和0 h组相比,2 h组HKC细胞未见SREBP-1和FAS mRNA表达变化,而4、6、12 h组HKC细胞SREBP-1和FAS mRNA表达均升高,其中6 h组升高最明显,分别是0 h对照组的3.578倍和4.272倍,差异有统计学意义.Western blot检测显示4、6和12 h组HKC细胞SREBP-1蛋白的前体和成熟片段表达均较0 h和2 h组增强,其中也是6 h组表达最强,前体和成熟片段分别是0 h组的4.106倍和5.167倍.免疫细胞化学技术显示SREBP-1蛋白在人肾小管上皮细胞株中定位于细胞质,在4、6和12 h组HKC内其表达明显强于0、2和24 h组.油红O染色提示胰岛素刺激6 h后HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒,而其他各组HKC细胞未见着色.结论 胰岛素呈时间依赖性引起人肾小管上皮细胞SREBP-1和FAS的上调,且作用在6 h达到高峰,并最终导致细胞内脂滴沉积,这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一.
胰岛素、人肾小管上皮细胞、固醇调节元件结合蛋白-1、脂肪酸合成酶、脂滴形成、时效性影响
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R322.61;R329.24;R589.22;R977.1(人体形态学)
河北省卫生厅医学重点指令20090050
2010-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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