10.3321/j.issn:1001-1978.2009.09.024
丙泊酚抑制机械牵张诱导的肺泡上皮细胞HMGB1启动子转录激活
目的 探讨丙泊酚对机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein, HMGB1)启动子转录激活的影响.方法 以基因重组技术将HMGB1启动子克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic,得到重组质粒pGL3-HMGB1P.采用脂质体介导的细胞转染技术将pGL3-HMGB1P和空载体pGL3-Basic分别转染A549细胞,以机械牵张和机械牵张+丙泊酚分别处理转染后的A549细胞,检测并比较荧光素酶活性,分别用Western blot和RT-PCR检测细胞HMGB1蛋白和mRNA的表达.结果 酶切和测序结果证实重组载体pGL3-HMGB1P构建正确,荧光素酶活性检测显示重组载体pGL3-HMGB1P在A549细胞中有效表达.与未牵张组比较,牵张组HMGB1启动子的转录活性和HMGB1表达均明显增加(P<0.05);与牵张组比较,牵张+丙泊酚组HMGB1启动子的转录活性和HMGB1表达均明显降低(P<0.05).结论 丙泊酚在转录水平通过抑制机械牵张诱导HMGB1启动子的转录激活而影响HMGB1的表达,可能是丙泊酚防治机械牵张引起炎症反应的机制之一.
丙泊酚、机械牵张、高迁移率族蛋白B1、肺泡上皮细胞、转录活性、启动子
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R322.35;R342.22;R394-3;R605.973;R655.3;R971.2(人体形态学)
广州市医药卫生科技资助项目2008-YB-012,2008-ZDi-14;广东省科技计划资助项目2007B31 509007;广东省医学科研基金资助项目A2009497
2009-11-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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