一种腺病毒载体疫苗的体外生物活性和细胞毒性研究

摘要：

目的 探讨一个以腺病毒为载体的人用疫苗(代号LMP-Ad)在传代动物细胞株上的表达能力和细胞毒性,为动物试验提供依据.方法 受试物LMP-Ad以不同感染复数(MOI=3000、1000、300、100和30)感染非洲绿猴肾细胞(Veto)、幼仓鼠肾细胞(BHK)、小鼠成纤维细胞(1929)和人胚肺二倍体细胞(KMB17)4种传代细胞株后,用免疫细胞化学染色法检测目的 蛋白LMP在细胞膜上的表达情况;在MOI=3×103、3×104、3 × 103、3×102和30时,用MTT法和FCM检测细胞相对增殖率(RGR)和细胞死亡率.结果 在4种细胞巾均检测到目的 蛋白的表达,其中BHK细胞呈弱阳性,而Vero和KMB17在MOI低至30时仍较好地表达目的 蛋白;随着感染剂量的提高,4种细胞的RGR下降而死亡率上升,其中以Vero细胞的变化最为明显.结论 受试物对上述细胞均具生物活性,并在高感染剂量时表现出对细胞的生长抑制和一定程度的损伤,4种细胞以Vero和KMB17对受试物最为敏感,更适于作为该类新药的体外研究模型.

关键词：腺病毒载体疫苗、表达、细胞毒性、免疫细胞化学、MTT法、流式细胞术

所属期刊栏目：24

分类号：R-332;R329.24;R329.25;R373.1;R394.2;R979.5(医学研究方法)

在线出版日期：2008-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1061-1064