氧化还原状态的改变控制手霉素诱导HL-60白血病细胞凋亡

摘要：

目的 研究手霉素对HL-60白血病细胞的作用,探讨其作用机制,主要是线粒体的改变.方法 使用人的白血病细胞株HL-60细胞.MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用Annexin V和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术检测细胞内NO生成和细胞凋亡.细胞内超氧阴离子通过二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)测定.应用化学发光法测定超氧歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)活性.采用荧光法测定谷胱甘肽(glutathione,GSH),萤光素-萤光素酶发光法测定ATP含量.免疫印迹技术检测细胞色素C和Mn-SOD的表达.结果 手霉素引起HL-60细胞活性的下降,且呈剂量依赖性.手霉素诱导产生反应性氧基(reactive oxygen species,ROS):NO和超氧阴离子,降低GSH,但不影响SOD.手霉素诱导线粒体降低细胞ATP的含量,线粒体肿胀和细胞色素C从线粒体释放到细胞质.手霉素诱导的凋亡与ROS的增加有关.用N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)抑制ROS可保护HL-60细胞逃避手霉素的细胞毒作用和避免手霉素诱导的凋亡.结论 细胞内ROS的产生对手霉素的细胞毒作用起非常重要的作用.手霉素通过包括上游ROS产生,线粒体形态改变和细胞色素C释放的线粒体途径,诱导白血病细胞凋亡.

关键词：白血病、凋亡、手霉素、反应性氧基、一氧化氮、超氧阴离子、线粒体、超氧歧化酶

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分类号：R329.24;R329.25;R73-351;R733.710.22;R979.14(人体形态学)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目7001196;广东省医学科研基金资助项目A2006020

在线出版日期：2008-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：772-777