10.3969/j.issn.1673-5552.2010.23.0012
人成熟转化生长因子β1蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
目的 构建人成熟转化生长因子β1(hmTGF-β1)的原核表达载体,表达并纯化hmTGF-β1蛋白.方法 应用RTPCR方法 获得hmTGF-β1基因,连接至自带6His标签表达载体pET23b,构建原核表达质粒pET23b-hmTGF-β1,诱导表达hmTGF-β1融合蛋白,镍亲合层析法纯化融合蛋白,并对纯化产物进行纯度分析.结果 成功构建了hmTGF-β1原核表达质粒pET23b-hmTGF-β1,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳分析,在约15kD处出现了一条新的蛋白条带,Western Blot结果显示该条带能够与His抗体特异性结合.应用Ni-NTA亲和层析法纯化目的 蛋白,分析纯度达95%.结论 成功构建了hmTGF-β1蛋白的原核表达质粒,并成功表达与纯化hmTGF-β1蛋白,为进一步复性、获得有活性的hmTGF-β1打下基础.
转化生长因子β1(TGF-β1)、原核表达、重组蛋白、分离和提纯
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R318.06(医用一般科学)
国家自然科学基金30770915
2011-09-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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