基于miRNA-mRNA调控网络探讨miR-34a-5p靶向Hh通路对LX2细胞增殖的影响

摘要：

目的 探讨miR-34a-5p靶向刺猬(Hh)信号通路对肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的调控作用.方法 采用生物信息学分析筛选出LX2细胞中靶向Hh信号通路的差异miRNA,通过Cytoscape构建miRNA-mRNA网络.体外培养LX2细胞,通过转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导建立LX2细胞活化模型.细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测miR-34a-5p过表达对LX2细胞增值活力的影响;流式细胞分析法(Annexin-V-FITC/PI)检测miR-34a-5p过表达对LX2细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western blotting分析miR-34a-5p过表达对声波刺猬(Shh)、脑胶质瘤相关癌基因1(Gli1)、脑胶质瘤相关癌基因2(Gli2)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 LX2细胞经TGF-β1诱导活化后,细胞活力显著升高,Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA表达均增高(P＜0.01).Hh信号通路特异性阻断剂环靶明脂可降低LX2细胞活力,下调Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA蛋白表达(P＜0.01).miR-34a-5p过表达可显著提高LX2细胞活力,上调Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA蛋白表达(P＜0.05).结论 miR-34a-5p靶向调控LX2细胞的Hh信号通路,过表达miR-34a-5p可以上调Hh信号通路相关蛋白表达,促进LX2细胞活化.

关键词：miRNA-mRNA调控网络、微RNA-34a-5p、刺猬信号通路、肝星状细胞、肝纤维化

所属期刊栏目：52

分类号：R318.14(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金81860821

在线出版日期：2023-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：582-589