白藜芦醇介导SI RT1干预地塞米松诱导成骨细胞线粒体自噬的研究

摘要：

目的 研究白藜芦醇(RES)参与糖皮质激素诱导的成骨细胞线粒体自噬的作用机制.方法 体外培养人成骨细胞hFob1.19,地塞米松(DEX)诱导细胞线粒体自噬,使用不同浓度的RES(10-8～10-6 mol/L)处理成骨细胞5～120 min,CCK-8法检测成骨细胞的增殖,透射电镜检测成骨细胞内的自噬小体,酶联免疫吸附实验、实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)、caspase 3、转录沉默信息调节因子1(SIRT1)、细胞自噬标志蛋白(LC3和Beclin1)和细胞线粒体自噬标志蛋白(TOM20和Hsp60)的活性表达.结果 DEX和RES作用成骨细胞2 h后,RES可明显减弱DEX对细胞增殖的抑制作用(P＜0.05);透射电镜显示,DEX+RES组自噬小体明显少于DEX组(P＜0.05);DEX可明显抑制成骨细胞内ALP活性,而RES明显改善了DEX对ALP蛋白活性的抑制作用(P＜0.05);RES可导致成骨细胞内caspase 3的蛋白活性明显降低(P＜0.05);RES以剂量依赖性和时间依赖性的方式增强成骨细胞中SIRT1的活性表达;RES单独作用成骨细胞,可显著抑制LC3和Beclin1 mRNA表达(P＜0.05),并降低细胞内TOM20(线粒体自噬标记蛋白)和Hsp60(线粒体基质自噬标记蛋白)的蛋白活性;RES可部分抑制DEX对成骨细胞线粒体自噬的激活效应.结论 RES通过上调SIRT1而增强成骨细胞的增殖活性,并抑制DEX诱导的成骨细胞线粒体自噬的发生.

关键词：转录沉默信息调节因子1、白藜芦醇、成骨细胞、线粒体自噬、骨质疏松症、糖皮质激素

所属期刊栏目：52

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金81971322

在线出版日期：2023-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：97-102