DNA损伤修复通路因子53BP1在骨髓干细胞自我更新和分化发育中的作用

摘要：

目的 探讨DNA损伤修复通路因子53BP1在骨髓干细胞自我更新及定向分化过程中发挥的作用.方法 构建53BP1全身敲除C57/6小鼠模型,免疫荧光染色检测53BP1在细胞中的定位,Western blotting对53BP1蛋白表达水平进行检测及鉴定;流式细胞术进行细胞分选和计数、细胞周期检测、以及细胞表面分子marker分析,对比WT组和Mut组细胞生长速率以及定向分化过程,Co-IP检测分析表观遗传学磷酸化修饰蛋白,SPSS 22.0对数据进行统计学分析.结果 体内和体外实验证实伴随KSL细胞分化发育进行,53BP1表达含量显著增加,53BP1基因敲除可影响KSL细胞的自我更新和定向分化以及表面分子标记的表达;53BP1基因敲除与否并不显著影响处于细胞周期G1/G0的KSL细胞百分含量;53BP1可影响磷酸化修饰蛋白的表达水平,53BP1基因敲除后磷酸化修饰蛋白p-H4(k20)和p-H3(k79)表达水平明显增加,但p-ATM和p-53-Ser-20含量显著减少.结论 53BP1参与并影响骨髓干细胞的自我更新及定向分化过程,53BP1基因敲除可显著影响磷酸化蛋白p-H4(k20)、p-H3(k79)、p-ATM和p-53-Ser-20的表达水平.

关键词：DNA损伤修复应答、53BP1、骨髓干细胞、自我更新、分化

所属期刊栏目：50

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金 81770001

在线出版日期：2021-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24