10.12007/j.issn.0258-4646.2020.10.006
miR-9-5P靶向CDH1、CTNNA1和ITGA6对脉络膜黑色素瘤细胞功能的影响
目的 探讨miR-9-5P对脉络膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移、侵袭的调控作用,并探寻其发挥作用的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6.方法 体外给予脉络膜黑色素瘤细胞转染阴性对照(NC)和miR-9-5p mimics.采用RTCA实时增殖实验检测细胞的增殖情况;EDU实验进一步检测细胞的增殖变化;流式细胞技术检测细胞的凋亡变化;Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力的变化情况;Targetscan生物信息学网站分析预测miR-9-5P的靶基因,并通过GO分类和KEGG富集分析找到与迁移和侵袭相关靶基因;Western blotting检测CDH1蛋白表达情况.结果 RTCA实时增殖实验结果显示,miR-9-5p能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B(t=6.925,P<0.05)及MUM-2C(t=4.762,P<0.05)的增殖;EDU实验结果显示,miR-9-5p能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B(t=4.779,P<0.05)和MUM-2C(t=4.514,P<0.05)的增殖;流式细胞检测结果表明,miR-9-5p能够促进脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B(t=7.385,P<0.05)和MUM-2C(t=4.893,P<0.05)的凋亡;Transwell实验结果显示,miR-9-5p能够抑制细胞的迁移和侵袭;生物信息学预测及分析得出与细胞迁移侵袭相关的3个miR-9-5p的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6;Western blotting证明CDH1是miR-9-5p的靶基因.结论 miR-9-5p能抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进脉络膜黑色素瘤细胞的凋亡,并通过调节CDH1,CTNNA1和ITGA6表达发挥调控作用.
脉络膜黑色素瘤、miR-9-5p、CDH1、CTNNA1、ITGA6
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R765.2(耳鼻咽喉科学)
辽宁省自然科学基金20180551171
2020-10-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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