Doxycycline诱导表达Msx2-GFP的鼠晶状体上皮Alpha-TN4细胞株的建立

摘要：

目的 利用基因开关调节系统(Tet-on),拟建立由doxycycline调控表达的Msx2诱导细胞株,经与SWISS-2DPAGE DATA比对,发现差异蛋白点.方法 向鼠晶状体上皮细胞(Alpha-TN4)中稳定转染质粒Msx2-GFP-M2和TAP-GFP-M2,转染后的细胞经过G418筛选,挑出doxycycline诱导Msx2-GFP表达且具有较低背景的诱导细胞株M8,将空载体细胞株T9作为阴性对照细胞株.并对2组细胞行二维凝胶电泳(2-DE)及基因表达微阵列进行分析.结果 从二维凝胶电泳图谱上获得蛋白质斑点.对照组T9检测到5 389个斑点,实验组M8检测到5 460个斑点.经与SWISS-2DPAGE DATA比对,发现差异蛋白点.经基因表达微阵列分析发现,与晶状体及白内障疾病相关的差异基因为Col3α1,并在RNA水平进行了验证.结论 Msx2基因过表达对Alpha-TN4蛋白质表达谱有影响,其中差异基因Col3α1与晶状体及白内障疾病相关.

关键词：Msx2、Col3α1、Tet-on系统、晶状体上皮细胞、诱导细胞株

所属期刊栏目：48

分类号：R776.4(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金81371003

在线出版日期：2019-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：499-501,506