miR-15b-5p靶向CDK4抑制脉络膜黑色素瘤细胞增殖

摘要：

目的 探讨miR-15b-5p通过靶向抑制细胞周期素依赖性激酶4 (CDK4) 的表达进而发挥负向调节脉络膜黑色素瘤细胞增殖的作用.方法 使用荧光素酶报告分析检测miR-15b-5p与CDK4结合情况.体外培养人眼侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞系MUM-2B, 分别转染negative control RNA、miR-15b-5p mimics、inhibitor nc RNA和miR-15b-5p inhibitor;采用实时定量PCR检测转染后miR-15b-5p的表达水平;采用Western blotting检测4组细胞中CDK4蛋白的表达量;采用CCK8检测4组细胞的增殖能力;采用流式细胞术检测4组细胞周期情况.结果 荧光素酶报告基因分析验证miR-15b-5p能够与CDK4 m RNA 3”UTR结合.与阴性对照组相比, mimics组miR-15b-5p表达显著增加 (t=25.01, P ＜0.000 1), CDK4的蛋白表达水平降低, 细胞增殖能力降低, 细胞G1期比例增高.而与inhibitor nc组相比, inhibitor组miR-15b-5p表达减少, CDK4表达水平升高, 细胞增殖能力增强, 细胞G1期比例降低.结论miR-15b-5p能够靶向抑制CDK4的表达, 造成肿瘤细胞发生G1期阻滞, 从而有效抑制脉络膜黑色素瘤细胞增殖.

关键词：脉络膜黑色素瘤、细胞周期素依赖性激酶4、miR-15b-5p

所属期刊栏目：48

分类号：R773.4(眼科学)

资助基金：辽宁省自然科学基金20180551171

在线出版日期：2019-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：230-235