10.12007/j.issn.0258-4646.2018.04.002
大鼠肝细胞与胰岛内皮细胞融合细胞系的建立及鉴定
目的 通过电融合法构建由肝细胞系及原代内皮细胞融合而成的杂交细胞.方法 利用EMS诱变构建BRL-3A HGPRT-缺陷型细胞;利用胆总管灌注法及胰酶消化法获得胰岛内皮细胞;利用CRY-3B细胞电融合仪及HAT筛选策略获得融合细胞;利用流式细胞仪对融合细胞的体积、细胞内颗粒密度及DNA含量进行检测;通过实时PCR及Western blotting检测融合细胞特异性基因的表达情况.结果 成功构建了一株由大鼠肝细胞系BRL-3A与原代大鼠胰岛内皮细胞融合而成的四倍体BRL-ies细胞.这株细胞既具有内皮细胞表型,表达CD31,又具有肝细胞特性,表达较高水平的谷氨酰胺合成酶.结论 肝细胞系BRL-3A可与原代内皮细胞融合形成较稳定的四倍体细胞,同时两者特征表型得以保留.
电融合、肝细胞、内皮细胞
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Q813.2(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金31370989
2018-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
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