慢病毒介导的靶向干扰MEX3A基因膀胱癌稳定细胞株的建立

摘要：

目的 构建针对MEX3A基因的shRNA慢病毒载体,建立稳定干扰MEX3A基因表达的膀胱癌细胞株.方法 采用实时PCR检测膀胱癌细胞株中MEX3A基因的表达;应用GV115质粒构建重组靶向MEX3A基因的shRNA慢病毒载体,鉴定及测序合格后,与包装载体共转染293T细胞产生慢病毒颗粒,病毒滴度测定后转染膀胱癌细胞,经抗生素筛选建立稳定表达siRNA的细胞株,实时PCR检测敲减效率.结果 MEX3A基因在膀胱癌5637和T24细胞中均有表达,且5637的表达量高于T24;鉴定及测序结果显示成功构建MEX3A-shRNA慢病毒载体,包装后病毒滴度较高,实时PCR结果表明慢病毒转染5637细胞后能稳定抑制MEX3A基因的表达.结论 应用慢病毒介导的RNA干扰技术可成功建立稳定抑制MEX3A基因表达的细胞株.

关键词：MEX3A基因、膀胱癌、慢病毒、细胞株

所属期刊栏目：46

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81371552

在线出版日期：2018-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1057-1061,1066