乳腺癌MCF-7细胞p21WAF1/CIP1启动子区雌激素受体α的高功能结合位点

摘要：

目的 研究雌激素受体(ER)α募集于p21WAF1/CIP1启动子区调控其转录活性的具体作用位点,明确辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)及瘦素(leptin)在调节p21WAF1/CIP1启动子功能中的分子机制.方法 将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol/L的SAHA 0.88 μL(SAHA组)、0.625 nmol/L的leptin 10 μL(leptin组)处理24 h,对照组在完全型RPMI-1640培养基中培养细胞.应用染色质免疫共沉淀技术将各组细胞裂解液与ERα抗体孵育,收集纯化结合ERα抗体的DNA片段,应用实时PCR法检测p21WAF1/CIP1启动子区从转录起始点到其上游(+ 2～-4 000 bp) f1 ～f10片段的DNA相对表达量并用2-△△Ct法分析.结果 对照组中,与ERα抗体结合的f1、f2、f8片段DNA相对表达量较f9片段高出2倍以上(P＜0.01).与对照组比较,SAHA及leptin组f1～f10片段与ERα抗体结合能力均降低,其中SAHA组f8片段DNA相对表达量达最低值(P＜0.01),且明显低于leptin组(P＜0.01).SAHA组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其升高(P＜ 0.05或0.01).leptin组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其降低,除f1外均有统计学差异(P＜0.01).结论 乳腺癌细胞增殖过程中细胞增殖信号招募ERα至p21WAF1/CIP1启动子区,且p21WAF1/CIP1启动子区-2 800bp～-3 200 bp区域存在与ERα高度结合的靶功能区.

关键词：乳腺癌、MCF-7细胞、p21WAF1/CIP1、雌激素受体α、辛二酰苯胺异羟肟酸、瘦素

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分类号：R977.12(药品)

资助基金：国家自然科学基金81172509;辽宁省自然科学基金201602735;沈阳市科学技术计划F15-199-1-28

在线出版日期：2017-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：677-680,685