miR-200c调控RhoA基因表达介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制的研究

摘要：

目的：研究miR?200c调控Ras基因家族成员A（RhoA）表达介导RMP7增加血肿瘤屏障（BTB）通透性的机制。方法应用real?time PCR检测RMP7作用BTB后人脑微血管内皮细（ECs）miR?200c的表达；应用miR?200c模拟物和miR?200c抑制物分别转染GECs（ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞），测量跨内皮阻抗值（TEER）、辣根过氧化物酶（HRP）渗漏量，分析BTB通透性；应用Western blotting检测RhoA的表达；应用免疫荧光方法观察GECs中RhoA表达和分布；应用双荧光素酶报告基因检测miR?200c转录后水平调控RhoA机制。结果 RMP7作用GECs后，使GECs内源性miR?200c表达显著降低；miR?200c模拟物和miR?200c抑制物成功转染到GECs中；miR?200c模拟物显著抑制RMP7诱导TEER值的降低、HRP的升高；miR?200c模拟物显著减少RhoA的表达，促使RhoA在GECs细胞质和细胞核分布减少；miR?200c模拟物转录后水平负性调控RhoA基因表达。miR?200c抑制物与miR?200c模拟物实验结果相反。结论 miR?200c转录后水平负性调控RhoA表达，介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制。

关键词：miR-200c、Ras基因家族成员A、RMP7、血肿瘤屏障、基因表达调控

所属期刊栏目：45

分类号：R338.2(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金81101918；81673028

在线出版日期：2016-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1057-1062