应用磁珠法检测并提取尿液游离甲基化DNA

摘要：

目的：依据血浆中存在游离DNA的理论，采用磁珠作为固相吸附载体并使用特定设计的试剂体系及提取流程，建立一种简便、高效提取尿液样本中游离甲基化DNA的方法，评价其作为用于尿液样本的甲基化基因检测技术的可行性。方法使用磁珠法提取40例成人尿液中游离甲基化DNA，进行甲基化修饰后，紫外分光光度计测定DNA的浓度和纯度。结果结果显示，提取50 mL尿液可得61~200 ng/μL的甲基化DNA，OD260/280为1.8±0.05。使用甲基化阳性对照DNA引物进行PCR及电泳后可见目的条带，说明其纯度可以满足后续甲基化基因检测和PCR等操作要求。结论尿液中确实存在游离甲基化DNA，同时磁珠法提取尿液游离DNA提取过程简单，且提取纯度高，是一种高效的提取方法。

关键词：磁珠、甲基化、尿液游离甲基化DNA

分类号：R446.12(诊断学)

资助基金：沈阳市科技计划项目F13-212-9-00

在线出版日期：2015-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：897-900