小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定

摘要：

目的：构建小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体。方法通过体外合成小鼠全长Sema3A cDNA，采用Gateway技术将其基因插入到pDown?mSema3A?IRES/EGFP质粒中，再交换重组获得重组质粒pLV/EXPNZ?puro?mSema3A?IRES/EGFP，经过测序鉴定后，包装与浓缩慢病毒载体pLV（Exp）?Puro?CMV?mSema3A?IRES/EGFP，最后重组慢病毒载体转染293T细胞获得病毒液。结果重组慢病毒载体11538 bp，测序结果证实Sema3A基因共2319 bp正确插入带有EGFP的载体中，成功构建小鼠Sema3A基因过表达载体。结论成功构建小鼠慢病毒载体pLV（Exp）?Puro?CMV?mSema3A?IRES/EGFP，为该基因在特定细胞内过表达株的筛选奠定基础。

关键词：Sema3A、慢病毒载体

分类号：R783.5(口腔科学)

资助基金：辽宁省科技厅2012225015

在线出版日期：2015-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：226-229,233