变性再复性方法提取高纯度Cav1.2片段GST-CT1及其生物活性的鉴定

摘要：

目的 探寻诱导谷胱甘肽转移酶(GST)与Cavl.2钙通道片段CT1重组的易形成包涵体的大分子融合蛋白的提取与纯化的方法.方法 在E.coli BL21中转化入pGEX-6p-3/CT1重组质粒并诱导表达,采用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER分离纯化GST-CT1融合蛋白,用Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白及其生物活性.结果 应用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER能够分离得到高纯度的易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白,且分离纯化的GST-CT1融合蛋白具有与钙调蛋白结合的生物活性.结论 操作简易的GST包涵体变性复性法能够针对易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白进行分离和纯化,且得到的蛋白具有生物学活性.

关键词：包涵体、变性再复性、钙离子通道

所属期刊栏目：43

分类号：R96(药理学)

资助基金：国家自然科学基金31071004,81100108

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：777-780