GST-HDAC4融合蛋白载体的构建及其蛋白表达

摘要：

目的 构建人HDAC4蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达和纯化.方法 用EcoRI单酶切pcDNA3.1-HDAC4质粒,得到hHDAC4全长编码序列,并将其克隆至原核表达载体pGEX-5X-1构建成新载体GST-HDAC4,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌BL21,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并纯化获得目的蛋白.Western blot检测重组质粒的表达.结果 酶切鉴定和测序结果显示,GST-HDAC4融合蛋白原核表达载体构建成功.考马斯亮蓝染色和Western blot结果显示,成功获得有生物活性的GST-HDAC4融合蛋白.结论 成功构建了HDAC4原核表达载体,获得有生物活性的GST-HDAC4蛋白.

关键词：GST-HDAC4、原核表达、融合蛋白

所属期刊栏目：42

分类号：Q257(细胞生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30900752,31271389

在线出版日期：2013-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：149-151