GPR40反义RNA对胰岛β细胞内Ca2+浓度及胰岛素分泌的影响

摘要：

目的 应用反义RNA技术特异性下调胰岛β细胞G蛋白耦联受体(GPR40)的表达,观察其对胰岛β细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)及胰岛素分泌的影响.方法 体外分离SD大鼠胰岛β细胞,将GPR40反义RNA表达载体pcDNA3.1(+)-GPR40(-)用脂质体体外瞬时转染胰岛细胞,Western blot检测GPR40蛋白的表达,将1.0 mmol/L游离脂肪酸(软脂酸∶油酸=2∶1)与胰岛细胞共培养10,30,60 min,进行高葡萄糖刺激胰岛素释放试验,利用荧光探针Fura-2/AM,测定胰岛细胞[Ca2+]i变化,放射免疫法检测培养液中胰岛素浓度变化.结果 与对照组和空白质粒转染组比较,GPR40反义RNA可显著降低细胞GPR40蛋白的表达水平(P＜0.05),在各作用时间点,GPR40反义RNA转染组[Ca2+]i显著低于对照组(P＜0.05),同时GPR40反义RNA转染组胰岛细胞的胰岛素分泌明显低于对照组(P＜0.05).结论 GPR40介导游离脂肪酸刺激β细胞内[Ca2+]i升高和胰岛素分泌.

关键词：C蛋白耦联受体40、反义RNA、游离脂肪酸、胰岛素分泌、细胞内钙

所属期刊栏目：41

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：辽宁省教育厅高校科研计划2008810

在线出版日期：2013-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1003-1006