p53RFP表达载体的构建及其对HEK293A细胞增殖的抑制作用

摘要：

目的 构建p53 RFP表达载体,观察p53RFP表达上调对HEK293A细胞生长的影响.方法 利用DNA克隆技术,将人p53RFP基因的编码序列克隆至质粒pcDNA4/Myc-HisA,经限制性酶切、DNA测序鉴定重组载体.质粒扩增提取,经脂质体介导法转染HEK293A细胞,实时定量RT-PCR、Western blot检测转染后p53RFP mRNA及蛋白的表达水平.采用CCK-8检测p53RFP表达上调对HEK293A细胞增殖的影响.结果 p53RFP转染后其mRNA及蛋白表达水平均显著上调;p53RFP转染后72 h、96 h,细胞增殖受到显著抑制(P＜0.01).结论 成功构建p53RFP表达载体pcDNA4-p53RFP,并可在HEK293A细胞内有效表达,其表达可抑制HEK293A细胞增殖.

关键词：p53RFP、表达载体、HEK293A

所属期刊栏目：41

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金青年基金资助项目30800462

在线出版日期：2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：494-496