HPC2突变体真核表达载体的构建
目的 构建在哺乳动物细胞表达的HPC2真核表达突变载体,并在U2OS细胞中表达.方法 从人U2OS细胞中克隆HPC2cDNA片段,并利用Gateway技术构建pcDNA3.2/V5/HPC2质粒.将质粒用脂质体瞬时转染U2OS细胞,细胞裂解后用Western blot分析HPC2的表达情况.设计突变引物,以HPC2质粒为模板进行PCR,将PCR产物连接并转化扩增,得到特定位点突变的pcDNA HPC2质粒.结果 PCR、酶切、测序均表明pcDNA-V5/HPC2突变质粒构建成功,并可在U2OS细胞中表达.结论 成功构建了pcDNA-V5/HPC2突变真核表达载体,为研究HPC2的功能提供了有力的工具.
HPC2、基因表达、突变、U2OS细胞
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Q78(基因工程(遗传工程))
2013-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1099-1102