外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响
目的 观察外源性硫化氢(H2S)对嗜铬细胞瘤细胞(PC12)β位淀粉样前体蛋白裂解酶1( BACE1)表达的影响,并探讨可能涉及的细胞信号机制.方法用不同浓度的硫氢化钠(NaHS)处理体外培养的PC12细胞,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1 mRNA及蛋白表达；继以LY294002和PD98059分别阻断磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3-K/Akt)及丝裂酶原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2( MAPK/ERK1/2)通路,Western blot法检测其对NaHS诱导的通路下游蛋白Akt1和ERK1/2磷酸化的影响及其对BACE1蛋白表达变化的调节；ELISA法检测细胞培养液中Aβ42水平的变化.结果NaHS在实验浓度范围内呈剂量依赖性下调BACE1mRNA及蛋白表达,200μmo/L时最明显,各NaHS组与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜ 0.05);LY294002抑制NaHS诱导的Akt1蛋白磷酸化,削弱NaHS对BACE1蛋白的下调作用,其表达在LY294002预处理组与NaHS 200μmol/L组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05)；而PD98059虽能抑制NaHS导致的ERK1/2蛋白磷酸化,但对其调节BACE1蛋白表达无影响,PD98059预处理与NaHS 200μmol/L组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);不同处理条件下的Aβ42表达与BACE1变化趋势基本一致.结论外源性H2S下调PC12细胞BACE1表达,其机制可能与PI3-K/Akt信号通路的激活有关,而与MAPK/ERK1/2通路无关.
外源性硫化氢、β位淀粉样前体蛋白裂解酶1、磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶、细胞外信号调节激酶1/2
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R741.02(神经病学与精神病学)
重庆市医学科研计划重点项目2010-1-17
2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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