GST-Fank1融合蛋白表达载体构建及表达纯化的研究

摘要：

目的 研究转录因子Fank1与GST融合蛋白原核表达栽体的构建和表达.方法 根据Fank1基因的DNA序列,经引物设计软件Primer Premier 5.0优化设计出上下游引物(Ⅰ,Ⅱ),同时在5'端引入BamH Ⅰ酶切位点,3'端引入Sal Ⅰ酶切位点.以pdsRED-Fank1质粒为模板进行PCR扩增Fank1目的 片段,经限制性内切酶酶切后连接到原核表达载体pGEX4T-2,构建成pGEX4T-2-Fank1原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3),通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导进行目的 蛋白表达.结果 经菌液PCR、电泳分析及测序证明成功构建了Fank1融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹显示,相时分子量为43 kDa的蛋白条带,与预期一致.结论 成功构建了pGEX4T-2-Fank1原核表达载体,并在原核细胞中有表达,为进一步研究转录因子Fank1的功能奠定了基础.

关键词：Fank1、融合蛋白、谷胱甘肽S-转移酶

所属期刊栏目：40

分类号：R339.2(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30770818;辽宁省科技厅计划项目2009408001-1

在线出版日期：2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：101-103